(一)原理
細胞內(nèi)還原型谷胱甘肽((GSH)可保護細胞免受損傷，藥物或毒物可通過使細胞內(nèi)GSH耗竭而導(dǎo)致細胞受損。
(二)材料
1.96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)的待測細胞與對照組細胞。
2．O．1mol／L PBS(pH8．0) 0．1mol／L Na2HPO4溶液170ml和O．1mol／L NaH2PO 4溶液34ml混勻。
3．DTNB溶液用0．1mol／L PBS配成6．5％TCA溶液。
(三)方法
培養(yǎng)細胞的96孔培養(yǎng)板，傾去培養(yǎng)液，加入O．1mol／L PBS洗滌各孔，倒掉PRS，加入6．5％TCA 0．05ml，4℃放置30min，再加入0．25ml的DTNB溶液，10min后在420nm處比色。
(四)結(jié)果
可計算受試物組細胞GSH的相對含量(％)
細胞GSH的相對含量越高，則細胞毒性越低；細胞GSH的相對含量越低，則細胞毒性越高。也可計算細胞GSH的含量，但要先繪制GSH的標(biāo)準(zhǔn)曲線，方法類似于蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(五)注意事項
若細胞在24孔培養(yǎng)板或6孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，可將細胞刮下來，經(jīng)超聲破碎或用溶解液溶解，再測定GSH量，但在96孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)則不必刮細胞，可直接經(jīng)6．5％TCA提取GSH，直接比色。
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