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    傘枝梨頭霉PCR試劑盒的樣品DNA的制備過程是怎樣的

    點(diǎn)擊次數(shù):791  更新時(shí)間:2021-11-26
       傘枝梨頭霉PCR試劑盒采用優(yōu)化的超順磁性磁珠和緩沖體系,可便捷回收PCR產(chǎn)物中的DNA,有效去除引物二聚體、dNTP、無機(jī)鹽及蛋白質(zhì)等雜質(zhì),整個(gè)過程操作簡(jiǎn)單快速,20分鐘即可完成實(shí)驗(yàn)。本產(chǎn)品具有回收DNA的片段,回收率高,DNA純度高等特點(diǎn),回收的DNA可直接用于酶切、測(cè)序、PCR等后續(xù)操作。
     
      傘枝梨頭霉PCR試劑盒的樣品DNA的制備:
      1、用自選方法純化樣品的DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
     
      2、如果有N個(gè)樣品,則需要進(jìn)行N+2個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
     
      3、配制溶液A工作液。如果待測(cè)樣品數(shù)量為其他數(shù)字,配制的溶液A工作液的體積需要做相應(yīng)的調(diào)整。
     
      4、在標(biāo)記好的N+2個(gè)離心管中,加入1-5mg固體樣品(半粒芝麻大小)或5uL液體樣品待測(cè)樣品。在樣品制備陽性對(duì)照中加入5uL陽性對(duì)照,在樣品制備陰性對(duì)照中加入5uL水。
     
      5、在每個(gè)管中加入100uL溶液A工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。
     
      6、95℃保溫10分鐘。
     
      7、待冷卻到常溫后加入10uL溶液B并混勻得DNA釋放液。每個(gè)樣品得到的DNA釋放液足夠進(jìn)行50-100次PCR。
     
      本試劑盒用于病料組織中病毒的檢測(cè),具有與柱提取方法相當(dāng)?shù)拿舾行裕矣帽驹噭┖锌擅獬M織研磨和核酸提取步驟,加快檢測(cè)流程,加大檢測(cè)能力,減少實(shí)驗(yàn)室污染。前期研究結(jié)果顯示,對(duì)于動(dòng)物各內(nèi)臟、耳、尾等組織,均不需要研磨而直接裂解。也可以對(duì)含有骨髓的骨組織,直接用試劑盒處理和擴(kuò)增。
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