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甲醛脫氫酶(FDH)生化檢測(cè)試劑盒

型 號(hào)

產(chǎn)品時(shí)間2023-11-05

所屬分類(lèi)輔酶Ⅰ系列

報(bào)價(jià)300

產(chǎn)品描述:甲醛脫氫酶(FDH)生化檢測(cè)試劑盒甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類(lèi)產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。

產(chǎn)品概述

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產(chǎn)品名稱(chēng):甲醛脫氫酶(FDH)生化檢測(cè)試劑盒

規(guī)格:100/96 50/48 

貨號(hào) : EY-01S113

測(cè)試方法:微量法 紫外分光光度法  

分類(lèi):輔酶系列

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測(cè)定意義

甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類(lèi)產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。

測(cè)定原理

甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。

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試劑一:液體×1瓶,室溫保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。              

試劑三:粉劑×2瓶,-20℃保存。臨用前加入22mL試劑二,現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑四:液體×1支,4℃保存。

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1、組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。16000g,4℃離心20min,取上清置冰上待測(cè)。

2、細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);16000g, 4℃離心20min,取上清液置冰上待測(cè)。

3、血清等液體:直接測(cè)定。

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(1)按照蛋白濃度計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫克蛋白每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(Cpr×V樣)÷T

=1608×△÷Cpr

(2)按照樣本質(zhì)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每克組織每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/g鮮重) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷(W×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A÷W

(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算

活性單位定義:25℃中每104個(gè)細(xì)胞每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反總×109)÷(細(xì)胞數(shù)量×V樣÷V樣總)÷T

=1608×△A ÷細(xì)胞數(shù)量13.png

(4)按液體體積計(jì)算

活性單位定義:25℃中每毫升血清每分鐘氧化1nmol NADH 為1個(gè)酶活單位。

ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反總×109) ÷V樣÷T

=1608×△A

ε:NADH摩爾消光系數(shù),6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光徑,1 cm;V反總:反應(yīng)體系總體積,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;V樣:加入反應(yīng)體系中上清液體積,100μL=0.1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,1min。

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(紫外波長(zhǎng),無(wú)需固定和透膜處理)

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胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基

PH6.80酸鹽緩沖液  500ml/  用于樣品稀釋處理

mTSB肉湯  mTSB Broth With Novobiocin  250  用于0157選擇性增菌(ISO方法)

TRAIL 蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒

APT瓊脂  250g    用于乳酸菌分離培養(yǎng)

GAM瓊脂  Anaerobic Agar  250  用于梭菌和其他厭氧菌的分離培養(yǎng)

ZENKER固著液

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